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多克隆抗体和单克隆抗体之间的主要区别及应用
什么是单克隆抗体?
单克隆抗体定义:
与靶抗原上的特定表位结合的一种(单一)抗体构成单克隆抗体。
单克隆抗体生产
为了产生单克隆抗体,是将免疫原注射到宿主动物中。一旦免疫原引起免疫反应,脾脏中的 B 细胞就会被提取出来并与骨髓瘤细胞(癌细胞 B 细胞)融合。
健康的脾细胞不会在细胞培养中无限期地存活,因此进行此融合过程以制造永生细胞系。通过该过程产生杂交瘤细胞系。
通过将脾脏中的单个 B 细胞融合并培养到它们自己的杂交瘤中,产生了所有产生相同特异性抗体的 B 细胞的单一培养物。
B 细胞将单克隆抗体分泌到细胞培养基中。在这里,它们被提取出来进行进一步的测试和纯化。
单克隆抗体杂交瘤克隆的产生提供了稳定的可再生抗体来源,确保每批与前一批相同。
为了产生一种分泌富含抗体的液体(称为腹水)的肿瘤,也可以将杂交瘤注射到小鼠的腹腔中。
单克隆抗体的用途:
单克隆抗体不适用于:
多克隆 |
单克隆 |
具有不同抗原互补位的异质抗体群 |
具有一个互补位的特异性抗体的同源群体 |
非表位特异性 |
表位特异性 |
与相似抗原发生交叉反应的可能性增加 |
低交叉反应性 |
背景噪音的可能性增加 |
低背景噪音 |
批次变异性 |
相同的批次 |
开发成本低 |
开发成本高 |
快速生产(约 3 个月) |
生产缓慢(约 6 个月) |
许多宿主物种选择 |
很少有宿主物种选择 |
什么是多克隆抗体?
多克隆抗体定义:
与靶抗原上许多不同表位结合的许多(多)不同抗体构成多克隆抗体。
多克隆抗体生产
将免疫原注射到宿主动物体内以产生多克隆抗体。动物中的免疫反应是由这种免疫原激活多个 B 细胞引起的,所有这些 B 细胞都针对免疫原上的特定表位。
大量具有不同互补位的抗体由此产生,因此对靶蛋白的亲和力不同。
免疫后,可以直接从血清(去除凝血蛋白和红细胞的血液)中使用这些多克隆抗体,或者将它们纯化以获得不含其他血清蛋白的溶液。
必须用抗原对新动物进行免疫以创建新批次,这意味着批次之间存在高度的可变性。
多克隆抗体的用途:
多克隆抗体不适用于以下领域:
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