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生物试剂探究-外泌体标志物-蛋白质和核酸
信息摘要:
 外泌体是由正常或病理条件下的细胞所分泌,含有各种膜蛋白和胞质蛋白等蛋白质和核酸。因此,外泌体标志物也可以作为生物试剂潜在地用于蛋白诊断。

文章标签:  外泌体 蛋白质 阿尔茨海默   生物试剂 

    外泌体是由正常或病理条件下的细胞所分泌,含有各种膜蛋白和胞质蛋白等蛋白质和核酸。因此,外泌体标志物也可以作为生物试剂潜在地用于蛋白诊断。 (图 2)。外泌体中发现的十种蛋白质主要包括热休克蛋白 8 (HSPA8)CD63 抗原 (CD63)β 肌动蛋白 (ACTB)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶 (GAPDH)、烯醇化酶 1 α (ENO1)、细胞溶质热休克蛋白 90 α (HSP90AA1)CD9CD81、酪氨酸 3-单加氧酶/色氨酸 5-单加氧酶激活蛋白、zeta 多肽 (YWHAZ)、肌肉丙酮酸激酶 (PKM2)  

外泌体分离

外泌体标志物蛋白  

外泌体蛋白属于各种功能组,例如四跨膜蛋白(CD9CD63 CD81)、热休克蛋白(HSC70 HSC90)、膜转运蛋白(GTPases)和脂质结合蛋白。

蛋白质

编号

主要蛋白型号

亚当10

26

Abcam ab124695 , R&D Systems MAB1427 , Santa Cruz Biotechnology  sc-48400

ATF3

21

Santa Cruz Biotechnology sc-188 , Abcam ab207434 

小窝蛋白-1

142

Cell Signaling Technology 3267 、BD Biosciences 610406 、Novus Biologicals  NB100-615 

CD10

273

Invitrogen MA5-14050 , Leica Biosystems PA0271 , BD Biosciences  555373

CD24

260

Invitrogen MA5-11828 、BD Biosciences 555428 、  BioLegend 311101

CD26 / DPP4

39

BioLegend 302702 , BD Biosciences 555435, Invitrogen  MA1-35147

CD29 / ITGB1

502

BD Biosciences 610467 , EMD Millipore MAB2079Z , Abcam  ab52971 

CD49d

110

BD 生物科学 555502, BioLegend 304302, Invitrogen  12-0499-42

CD63

214

BD Biosciences 556019 、Santa Cruz Biotechnology sc-5275 Abcam  ab8219 

CD69

497

BioLegend 310902 , BD Biosciences 560740 , Invitrogen  MA1-207 

CD81

114

BD Biosciences 555675 , Santa Cruz Biotechnology sc-166029 , Abcam ab79559 

CD9

177

Abcam ab92726, BD Biosciences 555370, Invitrogen  AHS0902

克劳丁

138

Invitrogen 37-4900Santa Cruz Biotechnology  sc-81796 、Abcam ab180158

表皮生长因子八

924

Cell Signaling Technology 4267 、Invitrogen MA1-12693 、Abcam  ab52894 

恩姆普林 / CD147

59

Santa Cruz Biotechnology sc-71038, BD Biosciences 555962 BioLegend 306209

胎球蛋白A

3

圣克鲁斯 sc-137102 , 义翘神州 10318 -R001  

GPC1

6

圣克鲁斯 sc-365000, EMD Millipore MAB2600  

GPRC5A

1

细胞信号技术 12968 

HSC70 / HSPA8

209

Santa Cruz Biotechnology sc-7298Enzo Life Sciences  ADI-SPA-815-D 、Abcam ab19136 

热休克蛋白70

29

BD Biosciences 610607multimmune GmbH  cmHsp70.1 、EMD Millipore MAB3516

热休克蛋白90

416

Santa Cruz Biotechnology sc-13119 、Cell Signaling Technology 4877  、BD Biosciences 610418 

HSP90AB1

111

Santa Cruz Biotechnology sc-13119 、Invitrogen 37-9400 Abcam  ab32568 

L1CAM

59

Invitrogen MA5-14140 、Abcam ab24345 MilliporeSigma  L4543

MSN/莫辛

27

Abcam ab52490 , BD Biosciences 610401, Santa Cruz Biotechnology  sc-13122

NKCC2

6

发育研究瘤库 T4 , Abcam ab171747  

PDCD6IP / Alix

54

Cell Signaling Technology 2171Santa Cruz Biotechnology  sc-53540Abcam ab117600

PSA

31

Santa Cruz Biotechnology sc-7316 Cell Signaling Technology  5365Dako M0750

RAP1B

1

细胞信号技术 2326 

抵抗素

2

研发系统 MAB13591 

生存素

176

Cell Signaling Technology 2808 、Santa Cruz Biotechnology sc-17779  、Novus Biologicals NB500-238 

TSG101

89

Santa Cruz Biotechnology sc-7964 、Abcam ab83 (20)、GeneTex  GTX70255

TYRP-2

5

圣克鲁斯 sc-74439 


2。外泌体标记物及其在免疫组织化学、免疫细胞化学、流式细胞术和 ELISA 等抗体应用中的常用的单克隆抗体。

生物试剂 Tetraspanins 是常见的外泌体标志物。它们包括 CD9CD63 CD81 膜蛋白。Tetraspanins 参与外泌体的产生。在抗原呈递细胞中,MHC-II 分子的功能通过它们整合到富含四跨膜蛋白 CD9 的细胞质膜区域中来调节。 

CD63外泌体蛋白被认为是癌症的蛋白质标志物。此外,四跨膜蛋白家族的另一成员CD81在丙型肝炎的细胞进入中起重要作用。慢丙型肝炎患者血清中的外泌体 CD81 会升高,表明 CD81 可能是丙型肝炎感染的标志物。

胶质母细胞瘤表皮生长因子受体 vIII (EGFRvIII) 被认为是胶质母细胞瘤的标志物。关于中枢神经系统,在脑肿瘤者血清中分离的外泌体中也检测到了 EGFREGFRvIII TGFβ

此外,外泌体还参与神经退行型症。在神经退行型症个体的脑脊液和外周血中检测到几种特定于阿尔茨海默氏症、帕金森氏症和 Creutzfeldt-Jakob 的聚集蛋白。特别是,在从阿尔茨海默者的脑脊液样本中获得的外泌体中检测到 Thr-181 磷酸化的 tau。在 Thr-181 磷酸化的 Tau 是阿尔茨海默的既定生物标志物。此外, α-突触核蛋白也常在阿尔茨海默者的群体中检出

此外,在尿液中发现的外泌体标志物也可以是膀胱和前列腺肿瘤的标志物。比如:视黄酸诱导蛋白 3 (GPRC5A) 抵抗素外泌体蛋白 PCA-3  TMPRSS2:ERG α1-抗胰蛋白酶组蛋白 H2B1

除了脑和泌尿道肿瘤外,外泌体蛋白也可以是胰腺癌的标志物。比如:结直肠癌的外泌体蛋白标志物包括 EpCAMcadherin-17、粘蛋白 13 (MUC-13)、角蛋白 18claudins ephrin B1


抗体蛋白

外泌体核酸

通过对外泌体以及外泌体提取相关生物试剂的研究发现:外泌体除了蛋白质,外泌体还含有 RNA。外泌体 miRNA 可用于各种肿瘤的判断(图 3)。目前有八种 miRNA 被确定为卵巢癌的标志物。此外,据报道,肺腺癌者的血清和肿瘤样本中的 miRNA 增加。前列腺癌血清中外泌体 miRNA miR-141 miR-375 水平升高。研究表明,外泌体 miRNA-21 的血清水平升高和 miRNA-1246 ESCC 群体凸现。有趣的是,外泌体 miRNA 可能是肾纤维化和心血管的潜在断标志物。对于进行退行疾病,在阿尔茨海默者的生物体液中发现了几种 miRNA,如 miR-9miR-107miRNA-128miRNA134 miRNA-137 miRNA124 的高表达水平。

外泌体 miRNA

应用

miR-21、-141、-200a、-200b、-200c、-203、-205、-214

卵巢癌

miR-17、-3p、-21、-20b、-223、-301、let-7f

肺癌

miR-141、miR-375

前列腺癌

miR-21、miR-1246

食管鳞状细胞癌

C21

乳腺癌

Let-7 家族 miRNA

胃癌

3。外泌体 miRNA 标记。

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