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TIANSeq rRNA Depletion Kit -RNA去除试剂盒

TIANSeq rRNA Depletion Kit -RNA去除试剂盒试剂盒对于完整和部分降解的总RNA（如FFPE RNA）均具有较好的rRNA去除效果，所获得的去除了rRNA的RNA样本可用于mRNA和非编码RNA高通量测序，可提高测序结果中有效数据比例，纯化产物也可用于随机引物cDNA合成或其它下游应用。

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NR101

产品简介

TIANSeq rRNA Depletion Kit (H/M/R) 采用特殊设计的DNA探针与核糖体RNA（rRNA）结合，利用Ribo RNase H降解DNA-rRNA杂交链中的rRNA，从而去除人、小鼠、大鼠总RNA中的细胞质核糖体RNA（28S、18S、5.8S、5S）和线粒体内核糖体RNA（16S、 12S），保留信使RNA（mRNA）和其它非编码RNA。

该试剂盒对于完整和部分降解的总RNA（如FFPE RNA）均具有较好的rRNA去除效果，所获得的去除了rRNA的RNA样本可用于mRNA和非编码RNA高通量测序，可提高测序结果中有效数据比例，纯化产物也可用于随机引物cDNA合成或其它下游应用。

产品特点

样本广泛：适用于高质量（完整）及部分降解（如FFPE）样本中rRNA的去除。
高效去除：有效去除95~99.9%的人/小鼠/大鼠的rRNA。
数据全面：保留了不完整mRNA和非编码RNA信息，使转录组数据更加全面。
快速评估：试剂盒中提供的引物可快速评估rRNA的去除效果。

推荐使用的其他试剂

1. 去除rRNA的RNA纯化：TIANSeq RNA Clean Beads (TIANGEN Cat#NG307)。

2. PCR检测rRNA去除效率，FastKing RT Kit (With gDNase) (TIANGEN Cat#KR116), SuperReal PreMix Plus (SYBR Green) (TIANGEN Cat#FP205) 。

注意事项请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。

1. 操作过程请注意避免核酸样品和产物之间的交叉污染。

2. 请使用不含RNA酶或DNA酶的枪头、离心管进行实验。

3. 实验开始前，请清洁操作台，建议使用RNA酶及DNA酶清除试剂处理台面。

确保没有 RNA酶和DNA酶的污染。

两步法4

4. 瞬时离心，将样品置于PCR仪中（启用热盖99~105℃均可），按以下程序操作，总共耗时约20 min。

注意：必须慢速降温(每秒降温0.1℃)，使探针与rRNA充分结合。

两步法2

操作步骤二

四、RNA纯化

推荐使用磁珠纯化产品TIANSeq RNA Clean Beads (TIANGEN Cat#NG307)，也可使用Agencourt RNAClean XP (Beckman Coulter)。

1. 涡旋振荡混匀TIANSeq RNA Clean Beads，吸取110 μl （2.2倍体积）至步骤三的50 μl RNA产物，用移液器吸吹混匀10次。

2. 室温静置15 min，使RNA充分结合到磁珠上。

3. 将样品置于磁力架上5 min，待溶液澄清后，用移液器小心移除上清。

4. 保持样品始终处于磁力架上，加入200 μl新鲜配制的80%乙醇（每次实验需要新鲜配制，因为乙醇易从空气中吸收水分，浓度降低影响实验效果）漂洗磁珠（不要吹散磁珠），室温孵育30 sec，小心移除上清。

5. 重复步骤4进行漂洗。

6. 取出离心管短暂低速离心 (<2000 g, 10 sec) ，使液体收集至管底，将样品放回磁力架，用移液器小心弃去所有液体。

7. 保持样品始终处于磁力架上，开盖晾干磁珠3～5 min （不要过度干燥，否则可能降低 RNA回收率。洗脱应当在磁珠依然显深棕色且光亮，而且所有可见液体已完全挥发时进行。若磁珠出现裂缝，则表示已过度干燥）。

8. 将样品从磁力架上取出，加入6.5 μl RNase-Free ddH2O ，用移液器吹打10次混匀磁珠，室温静置2 min。

注意：上述洗脱体积适用于TIANSeq RNA文库构建试剂盒NR102或NR103，如搭配其他 RNA建库产品，请根据产品说明书选择合适的洗脱体积。

9. 在磁力架上静置2 min，待溶液澄清后，不要触动磁珠，小心吸取5 μl上清（可根据步骤8 选择的实际洗脱体积进行相应调整，尽量充分利用洗脱产物）至新的Nuclease-Free PCR 管。

10. 洗脱样品可立即用于RNA测序文库构建或其他分析应用，也可在-20℃保存过夜或在-80℃保存30天。

步骤五

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