细胞转染试剂-QuickShuttle-Basic

QuickShuttle 系列转染试剂属于阳离子型转染试剂，具有高的效率、低毒和易于使用等特点，推荐用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建。

QuickShuttle 区别于常规转染试剂的两个最主要特点是：

（1）可在贴壁细胞传代尚未贴壁时立即进行转染（立传立转）；

（2）转染操作可在一分钟内完成。因此，QuickShuttle 适合用于快速大量瞬时转染表达目的蛋白。

QuickShuttle系列转染试剂选择一览表
 


产品名称	货号	规格	产品用途
QuickShuttle-Basic	KX0110041	0.8ml	适用于大多数哺乳动物贴壁细胞系，可用于原代细胞和二倍体细胞
QuickShuttle-Enhanced	KX0110042	0.8ml	适用于大多数哺乳动物细胞系，专用于难转细胞系
QuickShuttle-Superfast	KX0110043	0.8ml	细胞消化和转染同时进行，立传立转。可用于悬浮细胞
QuickShuttle-293	KX0110044	0.8ml	专用于各种293细胞，立传立转
QuickShuttle-Hela	KX0110045	0.8ml	专用于Hela细胞，立传立转
QuickShuttle-BHK-21	KX0110046	0.8ml	专用于BHK-21细胞，立传立转

细胞转染试剂-QuickShuttle-Basic使用说明：

 货号：KX0110041 

含量：0.8 ml 

用途：（1）用于大多数哺乳动物贴壁细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建； 

（2）用于大多数哺乳动物原代细胞和二倍体细胞的瞬时转染。

使用方法：

 1. 转染前 18~24 小时接种细胞到 24 孔细胞板中，每孔 5~10×104细胞，1ml 完全培养基。

备注：如果筛 选抗药性稳定细胞系，可以考虑简化的实验步骤，即在细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染，无 需 18~24 小时的等候时间。

 2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染试剂分别稀释到 50μl 生理盐水中。

备注：质粒 DNA 和转染试剂的最 适用量需要根据不同培养基来优化，但理论上不超出 1~2µg 和 3~5µl 范围。

 3. 合并上述两溶液并混匀。备注：无需其它转染试剂所需的 10~30 分钟的等候时间。

 4. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中，轻摇细胞板或用加样器吸打混匀。

备注：转染复合物可直接 加入含血清的细胞培养基中进行转染。在极少情况下会出现贴壁细胞脱落现象，可先从待转染细胞孔 中吸取 500µl 培养基与转染复合物预混后再加入细胞中。若在细胞瓶中进行转染，直接加入到无细胞 贴壁的对面或侧面并摇匀即可。 

5. 将细胞板移至 37ºC/5% CO2 孵箱中进行培养。备注：无需在转染后 4~6 小时补加血清或更换培养 基。

 6. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。

QuickShuttle-Basic 转染试剂使用注意事项：

 1. 质粒 DNA：请用能够去除内毒素的方法制备高质量的质粒 DNA。 

2. 稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒素纯水配制，高压消毒或除菌过滤。 

3. 培养基：经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，推荐使用含 5~10%牛血清的 DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。 

4. 以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒素质粒 DNA 用量为 2µg、转染试剂用量为 3~5µl，请在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告基因进行优化。 

5. 如果实验目的在于筛选抗药性稳定细胞系，可在细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染，从而可节省 18~24 小时的转染前细胞培养时间。