图1.使用StemScale培养基进行大规模扩增。在30次传代和20周培养中,StemScale培养基每次传代均可实现10倍以上的细胞扩增(左图)。与其他供应商的培养基“M”相比,StemScale培养基可在同一时间段内实现高达3倍的扩增(右图)。
开启PSC培养的新维度Gibco StemScale™ PSC悬浮培养基是一种可扩展、易于使用的培养基,支持在悬浮培养中大规模生成人多能干细胞(PSC)。
1.扩增能力—每次传代可实现5-10倍扩增
2.细胞扩增能力超出其他市售PSC悬浮培养基系统3倍以上
3.简化的工作流程—提供简单的培养基更换方案,
4.无需在培养或传代过程中使用微载体或细胞滤网
5.多种形式的可扩展性—支持将PSC培养
6.规模扩大至多种容器形式:多孔板、摇瓶和生物反应器
7.PSC细胞系间的一致性—在保持多能性和细胞活力的同时实现可靠且一致的球状体形成
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StemScale PSC悬浮培养基
Gibco StemScale™ PSC悬浮培养基是一种可扩展、易于使用的培养基,支持在悬浮培养中大规模生成人多能干细胞(PSC)。该款培养基经过专门配制,可解决当前PSC球 状体培养系统在聚集方面的技术挑战。
扩增能力强
—每次传代可实现5-10倍扩增,细胞扩增能力超出其他市售PSC悬浮培养基系统3倍以上
PSC细胞系间的一致性—在保持多能性和细胞活力的同时实现可靠且一致的球状体形成
Gibco StemScale PSC悬浮培养基通过球状体的自聚集进而支持悬浮多能干细胞的生长,非常适合需要大量高质量PSC的应用。
StemScale培养基每次传代可实现5-10倍扩增,细胞扩增能力超出其他培养基3倍(图1)。
图1.使用StemScale培养基进行大规模扩增。在30次传代和20周培养中,StemScale培养基每次传代均可实现10倍以上的细胞扩增(左图)。与其他供应商的培养基“M”相比,StemScale培养基可在同一时间段内实现高达3倍的扩增(右图)。
图2.StemScale培养基有助于维持细胞活性和多能性。与其他悬浮培养系统相比,StemScale培养基可在传代3次后提供优越的细胞活性,并且在传代30次后仍可维持高多能性。
与贴壁培养相比,在StemScale悬浮培养基中培养PSC球状体允许用户在更短的时间内培养更多数量的细胞(表1),同时减少培养基和塑料耗材的消耗量。
从6孔板的单个孔开始,相比贴壁培养,在悬浮培养中生长的细胞在时间和细胞数量方面显示出明显差异。
悬浮大规模培养 | 贴壁大规模培养 | |||||
总培养天数 | 培养容器形式 | 平均细胞产量 | 培养基消耗量 | 培养容器形式 | 平均细胞产量* | 培养基消耗量 |
---|---|---|---|---|---|---|
3天 | 6孔板(单孔) | 1.5 x 106 个细胞 | 6 mL | 6孔板(单孔) | 1.5 x 106 个细胞 | 6 mL |
7天 | 6孔板(全板) | 18 x 106 个细胞 | 30 mL | 100 mm 培养皿 | 9 x 106 个细胞 | 48 mL |
11天 | 100 mL 生物反应器 | 150 x 106 个细胞 | 200 mL | 150 mm 培养皿 | 22 x 106 个细胞 | 72 mL |
15天 | 500 mL 生物反应器 | 750 x 106 个细胞 | 1,000 mL | 经处理的Nunc TripleFlask细胞培养瓶 | 78 x 106 个细胞 | 800 mL |
19天 | 3 L 生物反应器 | 4.5 x 109 个细胞 | 6,000 mL | 2层Nunc Cell Factory系统 | 300 x 106 个细胞 | 1,200 mL |
23天 | – | – | – | 10层Nunc Cell Factory系统 | 1.5 x 109 个细胞 | 6,000 mL |
27天 | – | – | – | 30层Nunc Cell Factory系统 | 4.5 x 109 个细胞 | 18,000 mL |
*该值根据每种培养容器形式的4天扩增数据估计得出。3 L生物反应器和30层Thermo Scientific Nunc Cell Factory系统的值根据表中列出的较小生物反应器和Nunc Cell Factory系统形式推断得出。 |
表1.悬浮培养系统与贴壁培养系统的大规模培养。悬浮培养系统(使用StemScale PSC悬浮培养基)与贴壁培养系统的大规模培养。
图3.在StemScale培养基中生长的多能干细胞。在StemScale PSC悬浮培养基中接种的多能干细胞可在5天内维持最佳球状体大小和活性。
“StemScale培养基能够改善干细胞球状体形成的效率。”
—— S. Rieck,ViaCyte
图4.简化的工作流程(示意图)。使用StemScale培养基可轻松使贴壁培养适应到悬浮培养。StemScale培养基允许用户采用隔日换液的时间方案(如需要)。在StemScale培养基中开始培养后,通过更换50%的培养基以定期每天或隔天一次饲养Gibco游离型iPSC。
图5.隔日饲养的培养物在倍数变化(A)和多能性(B)方面与每日饲养的培养物相似。
对于在StemScale培养基中培养的4种不同的PSC系,每次传代均可实现6-11倍扩增,且在15天内可扩增18-28倍。
图6.悬浮培养系统与贴壁培养系统。悬浮培养系统(使用StemScale PSC悬浮培养基)与贴壁培养系统的大规模培养。
图8.直接从StemScale培养基培养的PSC球状体中诱导多巴胺能神经元。与35天的贴壁培养方案相比,在悬浮培养25天时使用PSC多巴胺能神经元(DA)分化试剂盒(货号A3147701)从StemScale培养基中分化的DA神经元共表达的FOXA2/Otx2数量相同(数据未显示)。
图9.在StemScale培养基中生长的悬浮PSC球状体分化为心肌细胞。(A)诱导形成心脏前,在StemScale培养基中生长的未分化的hPSC球体形态。(B)心脏诱导开始12天的球状体。(C)用心脏标记物α横纹肌肌动蛋白(绿色)和心肌肌钙蛋白T(红色)染色心脏类器官。细胞核用DAPI(蓝色)复染。
● 规格参数 / SPECIFICATION
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